Pwodwi yo

Analiz de evènman fosforilasyon pwoteome-lajè se toujou yon gwo defi analyse paske nan konpleksite a menmen nan rezo fosforilasyon pwoteyin.Nan travay sa a, nou evalye konplemantarite Lys-N, Lys-C, ak trypsin konsènan kapasite yo pou kontribiye nan analiz global fosfoproteom la.Yo te itilize yon vèsyon rafine nan echanj kasyon ki ba-pH fò pou separe avèk efikasite N-tèminal acetylated, fosforilasyon, ak peptides ki pa modifye.Yo te kapab idantifye yon total de 5036 fosfopeptid ki pa redondants ak yon pousantaj dekouvèt fo <1% soti nan 1 mg nan pwoteyin lè l sèvi avèk yon konbinezon de twa anzim yo.Done nou yo te revele ke sipèpoze ki genyen ant seri done fosfopeptid yo ki te pwodwi ak diferan proteaz te majinal, tandiske sipèpoze ki genyen ant de seri done triptik ki te pwodwi menm jan an te jwenn omwen 4 fwa pi wo.Nan fason sa a, itilizasyon paralèl Lys-N ak trypsin te pèmèt yon ogmantasyon 72% nan kantite fosfopeptid detekte an konparezon ak trypsin pou kont li, tandiske yon eksperyans replike trypsin te mennen sèlman nan yon ogmantasyon 25%.Kidonk, lè nou konsantre sèlman sou done yo tripsin ak Lys-N, nou idantifye 4671 fosfopeptid ki pa redondant.Plis analiz de sit yo detekte yo te montre ke Lys-N ak seri done trypsin yo te rich nan motif fosforilasyon siyifikativman diferan, plis prèv ke apwòch multiprotease yo gen anpil valè nan analiz fosfoproteom.