Pwodwi yo

Monogalactopyranosides nan fluorescein ak fluorescein methyl ester: sentèz, idroliz anzimatik pa biotnylated β-galactosidase, ak detèminasyon nan koyefisyan difizyon tradiksyon

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) ak d-glucopyranoside) ak ester methyl yo (MFMG) yo te prepare soti nan acetobromoglucose / galaktoz ak fluorescein methyl ester nan pwodiksyon bon.Eksperyans idroliz anzimatik (itilize β-galactosidase biotinylated) nan dérivés galacto yo te fèt ak paramèt sinetik yo te kalkile.Yo te obsève yon ogmantasyon 15-20 fwa nan entansite fliyoresans pandan idroliz la.Yo te note yon ogmantasyon lineyè nan fliyoresans nan yon ti tan ak konsantrasyon ki ba nan substra, ki fè konpoze sa yo itil ak sond sansib pou galactosidases.Gwosè valè Michaelis-Menten konstan (Km) pou MFMG pi wo pase sa ki nan FMG sijere yon chanjman konformasyon posib nan substra fluorojenik la.Km valè pou biotinylate β-Gal ak FMG pi ba pase sa pou anzim natif natal la.Obsèvasyon sa a endike pi wo afinite substra nan anzim nan biotinylate an konparezon ak anzim natif natal la.Koefisyan difizyon tradiksyon yo te mezire, pou tou de substrats fluorogenic ak tou de pwodwi yo, anplwaye spèktroskopi korelasyon fluoresans.Koefisyan difizyon tradiksyon pou substrats fluorojenik ak pwodwi idroliz anzimatik yo te mezire yo dwe menm jan an, nan seri a nan 3.5-4.5 × 10-10 m2 s-1.Se konsa, yon amelyorasyon oswa reta nan sinetik anzimatik akòz diferans nan mobilite translasyonèl nan substra ak pwodwi se pa sa ki aparan.