Pwodwi yo

Menm jan ak lòt viris RNA pozitif, tombusvirus yo repwodui pa konplèks viral replicase manbràn (VRC).VRC a konsiste de p92 viris ki kode RNA-depandan RNA polymerase (RdRp), viris p33 RNA chaperone a, ak plizyè pwoteyin lame ko-opte.Yo nan lòd yo vin yon RdRp fonksyonèl apre tradiksyon li yo, yo ta dwe enkòpore pwoteyin nan replikasyon p92 nan VRC a, ki te swiv pa aktivasyon li yo.Nou te deja montre nan yon tès ki baze sou ekstrè ledven san selil ki deklanchman RdRp Tomato bushy stunt virus (TBSV) mande pou yon faktè lame idrosolubl (yo).Nan atik sa a, nou idantifye pwoteyin selilè chòk chalè 70 (Hsp70) kòm faktè lame koopte ki nesesè pou aktivasyon yon TBSV RdRp recombinant N-tèminal tronke.Anplis de sa, bloke ti molekil ki baze sou fonksyon Hsp70 inibit sentèz RNA pa tombusvirus RdRp nan vitro.Anplis de sa, nou montre ke fosfolipid net, sètadi, fosfatidiletanolamin (PE) ak fosfatidilkolin (PC), amelyore aktivasyon RdRp nan vitro.Kontrèman, phosphatidylglycerol (PG) montre yon efè inhibitor fò ak dominan sou aktivasyon RdRp nan vitro.Nou demontre tou ke PE ak PC ankouraje RdRp-viral plis-strand RNA [(+)RNA] entèraksyon, pandan y ap PG inibit obligatwa nan RNA viral la ak RdRp la.Baze sou wòl stimulateur kont inhibiteur nan divès fosfolipid nan aktivasyon tombusvirus RdRp, nou pwopoze ke konpozisyon lipid nan manbràn subselilè sible yo ta ka itilize pa tombusviruses pou kontwole nouvo asanble VRC pandan enfeksyon an. (RdRp), ki responsab pou sentèz pitit RNA viral nan selil ki enfekte plizyè viris RNA pozitif, okòmansman inaktif.Estrateji sa a gen anpil chans pou evite sentèz RNA viral nan sitosol la ki ta rapidman mennen nan endiksyon repons antiviral selilè ki deklanche RNA.Pandan asanble konplèks la replikaz manbràn, RdRp viral la vin aktive atravè yon pwosesis enkonplètman konprann ki fè RdRp a kapab fè sentèz RNA.Lè nou itilize TBSV RdRp, nou montre ke chaperone selilè Hsp70 ak fosfolipid net yo fasilite aktivasyon RdRp nan vitro.Kontrèman, phosphatidylglycerol (PG) gen yon efè inhibitor dominan sou aktivasyon RdRp in vitro ak entèraksyon RNA RdRp-viral, ki sijere ke mikrodomèn manbràn ki antoure RdRp a anpil afekte kapasite li pou sentèz RNA.Kidonk, aktivasyon RdRp viral la gen anpil chans depann de plizyè eleman lame nan selil ki enfekte yo.